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快速液相色谱仪出现重复性误差故障应该如何处理?
2021-04-14
  快速液相色谱仪分离系统包括色谱柱、连接管和恒温器等,色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管),内径为2~5mm,由"不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,住内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成).固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔径可达1000)和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样),或者用化学法偶联各种基因(如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物,因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性,例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来,
  
  另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应,基质粒度小,微孔浅,样品在微孔区内传质短,这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的,根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大,这也进一步基质粒度小,会提高分辨率的道理,
  

  快速液相色谱仪重复性误差故障处理:
  1、进样阀漏液。
  2、加样针不到位。
  3、液量不足,
  
  处理对于种情况更换进样阀垫圈。对于第二种情况保证加样针插到底,样品溶液后须快速、平稳地从LOAD状态转换到INJECT状态,以保证进样量的准确,日常工作中,快速液相色谱仪的保养非常重要,注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积。样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞。色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等,


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